蜂蜜中还原糖含量的检测整体应用方案

一、应用背景

   还原糖是指具有还原性的糖类，能够还原斐林(H.von Fehling)试剂(本尼迪特试剂）或托伦斯(B.Tollens)试剂。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。

我们采用高锰酸钾电位滴定法测定蜂蜜中还原糖的含量，操作方便、准确度高，可作为有效测定方法。

     依据标准：GB/T 5009.7-2003 食品安全国家标准 食品中还原性糖的测定

二、配套仪器以及试剂

仪器：雷磁ZDJ系列滴定仪（电位滴定）

电极：213铂电极、232-01甘汞参比电极

试剂：0.5mol/L高锰酸钾标准滴定溶液（配制与标定参考文件 M9105-2015）

碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g硫酸铜（CuSO4•5H2O），加适量水溶解，加0.5mL硫酸，再加水稀释至 500mL。

碱性酒石酸铜乙液：称取34.5g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，再加水稀释至500mL，储存在橡胶塞玻璃瓶中。

硫酸铁溶液：称取50g硫酸铁，加入200mL水溶解后，慢慢加入100mL硫酸，冷却后稀释至1000mL。

三、实验过程

1、准确称取样品1.0g，精密称定，纯水溶解后定容至 1000 mL。移取 10.00 mL 溶解后的试样，于500mL烧杯中，加入25mL碱性酒石酸铜甲液及25mL乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在 4 min 内沸腾，再准确煮沸 2 min，趁热过滤，并用热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将砖红色滤渣放入滴定杯中，加 25 mL 硫酸铁溶液及25mL水，用玻璃棒搅拌使氧化亚铜完全溶解。置于自动滴定仪上。同时做空白试验。

2、仪器操作

a)将电极架置于滴定杯上方，放置好测量电极、参比电极以及加液管。

b)打开仪器，连接 213 铂电极至测量电极接口，连接 232-01 甘汞参比电极至参比电极接口。

c)将取液管连接到高锰酸钾标准滴定溶液中，使用仪器清洗按键，清洗三次，清洗液接至废液杯中。

d)点击开始方法滴定，选择动态滴定，设置参数。

e)点击开始测定，等待仪器自动检测。

f)分析结束，仪器显示结论，自动保存图谱及数据。

g)如不再测定，使用清洗按键，输液管连接纯水，清洗三次

h)关闭仪器，将参比电极浸泡至饱和氯化钾中，测量电极干放。

四、计算公式

X= 71.54×c（V₁-V₀）

其中：

X—试样中还原性糖质量相当于氧化亚铜质量的数值，单位为毫克（mg）；

V1—滴定试样时消耗高锰酸钾标准滴定溶液体积的数值，单位为毫升（mL）；

V0—滴定空白样时消耗高锰酸钾标准滴定溶液体积的数值，单位为毫升（mL） ；

c—高锰酸钾标准滴定溶液实际浓度的数值，单位为摩尔每升（mol/L）。

其中：

X—试样中还原性糖含量的数值，单位为克每百克（g/100g）；

m1—查表所得还原性糖质量的数值，单位为毫克（mg）；

m2—试样质量的数值，单位为克（g）。

五、注意事项

1)电极应避免长期浸在蒸馏水、蛋白质溶液和酸性氟化物溶液中。

2)参比电极的填充液为 3mol/L 氯化钾溶液，填充液可以从电极上端小孔加入，长时间不使用时，塞上加液孔，装上保护套，防止填充液干涸。

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