酸菜中苯甲酸和山梨酸的测定应用方案

苯甲酸和山梨酸是常用的食品防腐剂，如何测定酸菜中的苯甲酸和山梨酸呢？

一、仪器与试剂

1、仪器

高效液相色谱仪，超声波清洗机，涡旋振荡器，电子精密天平。

岛津UX220H电子精密天平（220g/0.001g）

2、试剂

甲醇，乙酸铵，亚铁氰化钾，乙酸锌，

苯甲酸钠标准品：CAS号：532-32-1，纯度≥99.0%，

山梨酸钾标准品：CAS号：590-00-1，纯度≥99.0%；

苯甲酸、山梨酸标准储备液(1000μg/mL)；

苯甲酸、山梨酸混合标准工作液：分别取10μL、50μL、100μL、200μL、500µL和1mL上述标准储备液于10mL容量瓶中，用水定容至刻度线，配制成苯甲酸和山梨酸浓度均为1.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL和100µL/mL的混合标准工作液。

二、实验方法

1、取样

准确称取约2g(精确至0.001g)试样于50mL具塞离心管中，加水约25mL涡旋混匀，于50℃水浴超声处理20min，冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL，混匀，于8000r/min离心5min，将水相转移至50mL容量瓶中，于残渣中加水20mL，涡旋混匀后超声5min，于8000r/min离心5min，将水相转移到同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混匀。取适量上清液过0.22µm微孔滤膜，待液相色谱测定。

2、色谱参考条件

仪器: 高效液相色谱仪：二元高压输液泵、AS自动进样器、柱温箱、紫外-可见光检测器；

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm；

流动相：甲醇：乙酸铵溶液(20mmol/L)=5:95；

流速：1.0mL/min;

进样量：10μL；

柱温：35℃；

检测波长：230nm。

3、结果

使用高效液相色谱仪测定酸菜中的苯甲酸和山梨酸，将标准品连续进样7针，保留时间的RSD均小于0.2%，峰面积RSD均小于1%。因此可以满足国家标准《GB 5009.28-2016 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定(第一法)》中苯甲酸和山梨酸含量测定的需求。