荧光分光光度计测试时要注意什么？

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1、样品应盛在四面透光的石英比色皿（荧光池）中，如果是挥发性样品应使用带塞的荧光池。

2、在荧光分析时，为了得到稳定可靠的数据，一般需要开机预热氙灯大约30min。如果仪器光源采用的是闪烁氙灯，预热时间可以缩短到10min左右。对某些易感光、易分解的荧光物质，尽量采用长波长、低人射光强度及短时间光照。

3、温度变化可引起荧光强度的改变。通常降低温度，有利于提高荧光量子产率，荧光强度增大。温度影响荧光强度的显著程度因样品而异，大部分荧光物质的荧光强度受温度影响不大，测试温度变化不超过±3℃，对测试结果几乎无影响。

4、当荧光物质是弱酸或弱碱时，溶液的pH对荧光强度有较大影响。因为弱酸或弱碱在不同酸度中，分子和离子的电离平衡会发生改变，而荧光物质的荧光强度会因其离解状态发生改变。以苯胺为例：在pH=7～12的溶液中会产生蓝色荧光，在pH<2或ph>13的溶液中都不产生荧光。再如，维生素B2（核黄素）在430～440nm蓝光照射下会发出绿色荧光，λem为535nm。它在pH=6～7的溶液中荧光强度大，而在pH=11时荧光消失；但在碱性溶液经光线照射发生分解作用或在酸性KMn04氧化下都会生成荧光强度比维生素B2强得多的黄光素，并可溶于。利用此性质可提高测定的灵敏度和选择性。