液相色谱仪流动相的配制与使用介绍

液相色谱仪是药物分析工作者最常使用的仪器之一，本文主要说明液相色谱流动相的配制与使用。

1、恒度洗脱

将水相与有机相混合后、使用混合型过滤膜抽滤，用一个管路(如A管)泵入仪器，这是基本原则。若使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器，极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。

剩余的流动相可继续使用，需密封后放置于阴凉处，待下次实验时与新配制的流动相混合后使用。无需担心发霉、无机盐析出、挥发、比例不准等问题。

2、梯度洗脱

流动相最为科学的配制方式如下：

（1）A相为高比例水相-低比例有机相，B相为低比例水相-高比例有机相(英国药典如此规定)；

（2）A相为高比例水相-低比例有机相，B相为纯有机相。

最不科学的为：A相为纯水相、B相为纯有机相，这会导致基线漂移严重，难以进行稳定的杂质检测。

梯度洗脱结束后，建议经5min后回到初始状态，再稳定5min后开始下一测定。这10min的稳定极为关键，切勿短时间内回到初始状态，会对仪器和色谱柱造成损害。一周内，对梯度洗脱进行连续试验，结果是：第一针与最后一针主成分保留时间相差均小于6s。

引申阅读：水相中溶质的溶解

水相中需溶解的无机盐和表面活性剂等固体溶质，建议采用加热法，不建议采用振摇、超声等方式。因为振摇、超声有可能使得溶质处于“临界胶团浓度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有机溶剂、温度剧降等)，极易析出结晶，损伤仪器和色谱柱，呈现泵头处析出“盐和白粉”的现象。

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