液相色谱仪不同检测器原理说明

液相色谱仪检测器的最早思路，一直是努力去除流动相，来适应气相检测器。但最终发现，液体和气体之间的转化非常麻烦，而且不够稳定。最终调转了方向，发展出了和气相几乎完全不一样的液相检测器技术。

检测器其实就是一个转换器，它把化合物的物理性质或者化学性质，转换成一个和这个理化性质有关的电信号。每一种检测器的使用要求，都和背后的原理有关。

1、紫外检测器

最常见的紫外检测器，就是根据化合物对紫外光的吸收能力，把浓度信息转化为吸光度，再通过光电二极管，把光的信号转化为电信号，然后，被计算机收集和记录。由于紫外吸收能力是一种非常稳定的物理性质，所以紫外检测器也是一种非常稳定的检测器。

在有些标准方法中会使用254nm作为检测波长，那你们有没有想过，为什么是这个数字呢？这和历史的发展有关。在很长一段时间里，紫外检测器中使用的是低压汞灯。而低压汞灯的最大发射波长，也就是汞的原子发射线是253.7nm，四舍五入，就是254nm。也就是说，在这个波长下，灯能量最高，灵敏度最好。然而现在，对于普遍使用氘灯的紫外检测器，254nm其实并没有特别的意义。

现在的分析方法，更多是考虑化合物的最大吸收波长和避开流动相的干扰。紫外检测器对于流动相的要求是不要有紫外吸收的干扰。然而，完全没有紫外吸收的有机溶剂是没有的。所以为了把流动相的干扰降到最小，通常测试波长会避开溶剂的截至波长20nm以上。

气泡的存在也会对吸光度的测定产生干扰，所以预防流通池里产生气泡就很重要。一般的紫外检测器会在出口加一条背压管，产生一点点后压，阻止气泡的形成。

2、示差折光检测器

示差折光检测器RID，原理就是利用物质的折光效应。

折光和密度有关，当化合物进入流通池时，密度可能会比流动相更大，也可能更小。所以示差折光检测器既会出正峰，也可能出负峰。密度受温度的影响特别大，所以示差检测器是所有液相检测器中，对检测器保温要求最高的。另外，不同的流动相比例，密度肯定会不一样，会引起基线的持续变化。因此示差折光检测器不能使用梯度洗脱，只能用等度洗脱。

示差折光检测器在液相分析中的地位，有点像气相的热导检测器，都是利用折光或者热导，这种非常普遍的物理性质来进行检测，通用性好但灵敏度不太好。一般是浓度比较高，或者其他选择性检测器都没有响应的时候，才会使用。

3、荧光检测器

荧光检测器，顾名思义是用来检测能产生荧光效应的物质。

自然界中能发射荧光的化合物是很少的，这既是缺点，更是优点。因为来自于背景中的干扰会很小，灵敏度非常高。荧光检测器对流动相有一个特别的要求，就是要严格脱气。这是由于气泡中的氧气会引发荧光猝灭效应，造成峰面积大幅度下降。

4、蒸发光散射检测器

蒸发光散射检测器ELSD，它利用的物理性质是光散射效应。

空气中的颗粒越多，散射越明显。蒸发光散射检测器通过雾化器等去除溶剂，让化合物形成悬浮的颗粒，就像阳光中漂浮的尘埃。所以它对溶剂是有要求的，不能使用不挥发的盐类，而要用醋酸铵之类的挥发性缓冲盐来替代。从原理上就可以看出，蒸发光散射检测器更适合分子量大的化合物，这样才能形成更明显的散射效应。

（内容来源色谱学堂）