液相色谱仪氨基柱使用注意事项介绍

一、液相色谱仪氨基柱正相使用清洗与保存

1.1 收到柱子后，如果使用正相的方法，可直接用流动相平衡。用完后保存在异丙醇或正己烷中。

1.2 推荐先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积，最后换成流动相。

1.3 正相使用时，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于还原糖的分析；流动相要彻底脱气，并不得含有羰基化合物和过氧化物（质量不好的乙醚、四氢呋喃含有少量）。

1.4任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。

二、反相使用清洗与保存

2.1 由于新的LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，与反相流动相是不互溶的，因此如果使用反相的方法，必须用异丙醇冲洗仪器管路，除去管路中的乙腈，甲醇或水，再必须用至少20倍柱体积的异丙醇冲洗过渡（约3h，0.5mL/min），以除去正相保存溶液。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速即可。

再用至少10倍柱体积95％水-5％乙腈（或甲醇）冲洗（不含缓冲盐的流动相可省去），最后用流动相平衡。

用完后洗柱时，必须先用95％水冲洗至少10倍柱体积，除去所用缓冲盐（不含缓冲盐的流动相可省去）。然后保存于乙腈/水（80：20）溶液中。长期不用的话，建议用异丙醇保存。

2.2 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶，并不会导致盐结晶。

三、其它注意事项

3.1 反相条件下使用时，要特别注意控制pH值范围，pH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。LUNA 氨基柱pH范围为1.5-11.0，能耐100％水。

3.2 有一种情况是，当使用氨基柱进行酸性物质的分析时，酸性物质的存在意味着质子的存在，可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱（冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨），之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。

（内容来源化验员之家）

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